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工业微生物菌种改造的新方法———优势小基因组生产菌的构建
菌种改造 必需基因 基因组精简
2012/3/20
本文介绍了构建优势小基因组生产菌株的必要性和可行性;介绍了优势小基因组工业微生物的构建原理和方法;同时,还介绍了几个目前已成功应用的通过基因组精简提高生产效率的例证;最后,结合作者的研究对优势小基因组生产菌的应用进行了展望。
串联亲和纯化原核表达载体的构建
原核表达载体 串联亲和纯化 蛋白相互作用
2012/3/21
【目的】构建串联亲和纯化原核表达载体,用于研究细菌中( 生理状态或接近生理条件下的) 蛋白-蛋白相互作用。【方法】设计并合成两条串联亲和标签序列,分别可以在靶蛋白N 端和C 端融合Protein G 和链亲和素结合肽(Streptavidin binding peptide,SBP) 标签;以pUC18 载体为骨架,去除原有的阻遏蛋白基因,构建组成型表达载体pNTAP 和pCTAP。【结果】成功构...
用硫酸铵沉淀法从泡桐内生枯草芽孢杆菌JDB-1发酵液中粗提枯草菌素,采用纸片扩散法和琼脂糖扩散法分别检测枯草菌素对细菌和真菌的抑菌活性,采用PCR从菌株JDB-1基因组DNA中扩增出枯草菌素基因spaS,并克隆到pMD18-T载体,测定spaS基因的核苷酸序列.结果表明硫酸铵粗提的枯草菌素对大肠杆菌K12、恶臭假单胞杆菌AS1.1003、赤霉菌JSD-2、赤霉菌JSD-7和白色念珠菌ATCC101...
新疆特殊生境岩石内生细菌末端限制性片段长度多态性技术分析
岩石内生细菌 T-RFLP 多样性
2012/3/21
【目的】了解新疆特殊生境不同类型岩石内生细菌的组成及多样性。【方法】采用末端限制性片段长度多态性技术(Terminal Restriction Fragment Length Polymorphism,T-RFLP),分析新疆乌苏花岗岩(1 号样)、一号冰川和木垒变质岩(2,3 号样)、裕民和托克逊岩石漆(4,5 号样)内生细菌群落。【结果】样品间多样性指数变化不大;聚类分析表明岩石类型相同,其相...
采用深海中温菌Wangia profunda (SMA87)的胞外多糖对对硝基苯胺进行吸附试验。分别用热分析仪、FTIR和Zeta电位仪对胞外多糖进行表征分析,并研究了吸附时间、胞外多糖用量、pH和温度等方面对其吸附规律的影响。结果表明:胞外多糖可有效去除水中的对硝基苯胺。20?℃时,01?g/L的SMA87胞外多糖吸附处理50?mL初始浓度为15?mg/L的对硝基苯胺水样120?min后,...
从胜利油田和冀东油田采集被石油污染的土壤样品,经富集技术培养后,从中分离出21株脱硫菌,再从中筛选出一高效脱硫菌株TV9704。这一菌株不能以正十二烷、正十六烷、液体石蜡、萘和柴油为碳源和能源生长,因此不会明显地损失石油的燃烧值;但它能利用噻吩或二苯并噻吩(DBT)作为唯一硫源来生长。本实验中噻吩和DBT的浓度使用UV分光光度计测定。菌株TV9704在噻吩起始浓度为632 mmol/L的培养...
水生生态系统富营养化与细菌群落之间的关系尚不明确。本文通过构建和分析16S rRNA基因片段克隆文库, 以期揭示乌梁素海富营养化水体细菌的多样性及其系统发育关系, 并探讨富营养化与细菌多样性之间的关系。利用Hae III对文库中的87个克隆子进行单酶切, 产生了23种带型, 文库覆盖度达到了73.6%, 反映出文库有较好的代表性。选择每种OTU的一个代表克隆进行测序分析, 基因序列系统发育分析结...
Variation of Sym Plasmid and Symbiotic Effectiveness in Isolates of Rhizobium fredii
Rhizobium fredii sym plasmid symbiotic effectiveness variation
2009/9/22
The genetic diversity of symbiotic plasmids (pSyms)and symbiotic effectiveness was investi—
gated in 1 1 isolates from one field population of Rhizobium fredii that had previously been charac—
teriz...
在K+缺乏的FeSO4-H2O体系(pH 2.5)中,利用氧化亚铁硫杆菌对亚铁的生物氧化作用,合成了一种新型羟基硫酸高铁矿物Schwertmannite(施氏矿物)。借助扫描电镜(SEM)、X射线衍射(XRD)、傅里叶转换红外光谱(FTIR)、电感耦合等离子体原子发射光谱(ICP-AES)等方法对其组成和结构进行了分析与表征,同时还对其重金属吸附性能进行了研究。结果表明,A.ferrooxidan...
摘要 利用某些微生物代谢过程中产生酶的特点,筛选出能够大量生成葡萄糖氧化酶 的地衣芽孢杆菌,并将其固定在Sephadex 100或海藻酸纳-氧化钙(载体)上,首 次研制成微生物酶传感器。它不仅具有酶传感器的所有优点,同时也克服了酶传感 器的缺点,使用寿命长,性质稳定,成本低,易于保存等。通过优化微生物和其代 谢所产生的葡萄糖氧化酶的固定化方法和利用葡萄糖氧化酶氧化葡萄糖产生过氧化 氢的反应机理,建...
摘要 某些稀土盐类及其配合物抑菌性强、抑菌谱广,尤其对生命力极强的芽孢菌有 着更为突出的抑菌效果。本文的研究目的是探索稀土盐类及其配合物对芽孢菌的抑 菌机理;采用生物和化学方法,对芽孢进行破碎及成分的分离,借助电镜细胞化学 技术、红外光谱法、荧光分析法、原子吸收光谱法等检测手段,从分子水平上确定 了稀土离子在芽孢中的结合位点,提出了稀土对芽孢菌的抑菌机理是稀土离子取代 了芽孢内2,6-吡啶二羧酸钙...
摘要 笔者曾在合成青霉素的过程开发了在连氯基青霉素上引入6α烷氧基的方法. 本文运用这一方法于头孢菌素系列在7α位引入烷氧基, 连氮基头孢菌素, 由于硝基的强吸电子性, 使共轭链的电子云向其偏移, 在C7位形成缺电子中心, 这样低级烷氧基可以相应的醇在温和条件下在质子酸存在下立体选择性地引入C-7α位, 叔丁醇和C74的高级醇不起反应. 运用这一方法合成了12个7α-烷氧基-7β-腙头孢菌素二苯甲...
土壤呼吸中根系与微生物呼吸的区分方法与应用
土壤呼吸 根系呼吸 区分方法
2007/12/20
土壤呼吸中根系呼吸和微生物呼吸的区分在研究生态系统碳循环和土壤碳储量时具有重要意义。较系统地介绍了各种区分方法,主要包括成分综合法、生物量外推法、根去除法、同位素标记法等。现国内研究中使用生物量外推法较多,但其相关性较差。根去除法又可分为根移除法、挖沟隔离法和林隙法,由于是就地测定,其数据可信度较高。同位素标记法包括脉冲标记法和连续标记法,该方法避免了大的干扰,数据较准确,缺点在于设备复杂、操作困...