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Ri质粒介导马铃薯Y病毒外壳蛋白基因(PVY-CP)转化烟草的研究
Ri质粒 转化烟草 再生植株
2013/7/19
将已克隆在大肠杆菌中的ＰＢＣＹ ４０１质粒（携带马铃薯Ｙ病毒外壳蛋白基因（ＰＶＹ ＣＰ基因），通过三亲杂交导入具Ｒｉ质粒的发根农秆菌中，用转化子溶液感染烟草，在Ｒｉ质粒介导下，将ＰＶＹ ＣＰ基因导入烟草。首先用烟草的外植体与转化子菌液共培养法诱导毛状根，以毛状根为外植体在含有抗生素Ｋｍ的分化培养基上诱导愈伤组织和幼芽，继续培养获得再生植株。再生植株经冠瘿碱、ＰＣＲ、分子杂交检测，有２０％以上的植株...
<正> 1982年,Hawkes 等人仿照分子生物学中点杂交(dot hybridization)的方法发展了斑点免疫结合测试技术(DIBA)用于检测单克隆抗体。本实验就 DIBA 应用在检测转基因烟草。烟草用发根农杆菌 Ri 质粒介导,将烟草花叶病病毒外壳蛋白基因(TMV—CP)和黄瓜花叶病毒外壳蛋白基因(CMV—CP)导入烟草的叶片外植体中,通过对外植体的培养,得到愈伤组织,从愈伤组织进而获得...