搜索结果: 1-14 共查到“食品卫生学 PCR”相关记录14条 . 查询时间(0.14 秒)
NS0宿主细胞残留DNA检测(定量PCR-Taqman探针法)方法的验证。方法 针对小鼠骨髓瘤细胞(NS0)基因组重复序列设计合成多对引物、探针,通过实验优选最佳的引物探针组合;应用所建立的前处理试剂盒(磁珠法)对供试品中宿主细胞残留DNA进行富集纯化;根据《国际人用药品注册技术协调会(ICH)》及《中国药典》通则9101的要求,应用所建立的NS0宿主细胞DNA残留检测试剂盒进行线性与范围、准确度...
草莓中诺如病毒和甲肝病毒的多重实时荧光逆转录PCR检测方法的建立
草莓 诺如病毒 甲肝病毒 多重实时荧光RT-PCR 食品安全
2015/11/11
建立草莓中诺如病毒GI、诺如病毒GII和甲肝病毒等3种食源性病毒的多重实时荧光RT-PCR检测方法,并应用于实际样品检测。方法 对草莓样品进行前处理、病毒富集、病毒RNA提取和纯化后,先采用单重实时荧光RT-PCR进行检测,随后进行多重实时荧光RT-PCR反应条件优化,建立多重实时荧光RT-PCR检测方法并分析其特异性和灵敏度。结果 所采用的病毒富集和核酸提取方法可以实现病毒的有效富集和抑制剂的去...
常见食源性致病菌PCR快速检测技术建立
食源性致病菌 聚合酶链式反应(PCR) 快速检测
2014/11/17
验证常见食源性致病菌聚合酶链式反应(PCR)检测方法特异性,并建立相应的快速简便PCR检测新体系。方法 利用166株实验菌株验证4种常见食源性致病菌PCR检测方法的特异性;同时,针对副溶血性弧菌、沙门菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特菌的toxR、fimY、nuc、hly基因序列设计特异引物,通过统一PCR 反应条件和缩短反应时间,实现对4种常见食源性致病菌的快速检测。结果 4种常见食源性致病...
免疫磁珠富集联合荧光定量PCR快速检测牛肉馅中产志贺毒素大肠埃希菌O26∶H11
产志贺毒素大肠埃希菌O26∶H11 牛肉馅 免疫磁珠分离 实时荧光定量PCR 食源性致病菌 食品安全
2015/11/23
建立肉制品中免疫磁珠富集(IMS)联合实时荧光定量PCR(qPCR)技术快速检测牛肉馅中产志贺毒素大肠埃希菌(STEC)O26∶H11的方法。方法 建立针对编码O26抗原wzx基因实时荧光定量PCR方法,并验证其特异性和敏感性；人工污染不同浓度STEC O26∶H11的牛肉馅样品,在增菌不同时间后,将增菌液原液、增菌液经免疫磁珠特异性捕获分离物分别进行qPCR检测及平板分离。结果 qPCR检测O2...
建立鉴定空肠弯曲菌和结肠弯曲菌的多重PCR(mPCR)方法。方法 分别以16S rRNA、马尿酸酶和16S-23S rRNA基因为靶序列设计特异性引物,建立多重PCR方法检测37株菌株样品,同时采用ingene CAM nested PCR检测试剂盒检测验证,进行结果比较分析。结果 该多重PCR方法可扩增出空肠弯曲菌和结肠弯曲菌的特异性条带,其他对照菌株均未扩增出条带,具有较好的特异性；检测敏感性...
TaqMan-MGB探针实时荧光定量PCR检测克罗诺杆菌MMS基因方法的建立
克罗诺杆菌(原阪崎肠杆菌) 实时荧光定量PCR TaqMan-MGB探针 局部大分子合成操作子 MMS基因 食源性致病菌 食品安全
2015/11/23
建立克罗诺杆菌的特异、灵敏的TaqMan-MGB探针实时荧光定量PCR检测方法。方法 根据GenBank公布的克罗诺杆菌MMS基因高保守序列,设计特异引物和TaqMan-MGB探针,建立和优化反应体系,用25种其他常见致病菌评价反应体系的特异性,用克罗诺杆菌MMS基因重组质粒构建实时荧光定量PCR标准曲线,对重组质粒、纯菌和人工模拟污染样本进行灵敏度试验,并与FDA推荐的TaqMan探针实时荧光P...
建立单增李斯特菌的多个靶基因快速检测手段,提高检测的准确性。方法 根据单增李斯特菌4个毒力基因(hly、prfA、inlA、inlB)设计引物,通过优化引物浓度和引物组合,进行多重PCR扩增,产物经变性高效液相色谱(DHPLC)进行快速检测。结果 出峰顺序依次为inlB、hly、inlA、prfA,扩增片段大小为146、210、255、388bp,此方法具有良好的特异性,灵敏度可达到280cfu/...
实时荧光PCR法检测奶制品中常见谷物成分
Taqman实时荧光PCR rbcL基因 谷物源性成分 奶制品 掺杂掺假 食品安全
2015/11/20
建立Taqman实时荧光PCR法对奶制品中掺加物大米、玉米、小麦、高粱、大麦等谷物源性成分的初筛检测体系。方法 以常见掺加物大米、玉米、小麦、高粱、大麦等谷物的叶绿体rbcL基因作为靶基因,通过BLAST软件比对,选择其同源保守区域设计引物和探针。经通用性、特异性、灵敏性试验对探针和引物可行性进行验证,并通过模拟含谷物奶粉及市售奶类制品检测对其实际检测能力进行验证。结果 所建立体系可扩增大米、玉米...
对沙门菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌O157∶H7、单核增生李斯特菌和福氏志贺菌5种食源性致病菌的多重PCR反应条件进行优化并分析方法的DNA检测限。方法 根据沙门菌的invA基因、金黄色葡萄球菌的16S rDNA基因、大肠杆菌O157∶H7的eaeA基因、单核增生李斯特菌的hlyA基因和福氏志贺菌的ipaH基因设计5对特异性引物进行多重PCR,对反应条件包括镁离子浓度、引物浓度和退火温度进行优化试...
建立检测活的非可培养(VBNC)状态副溶血性弧菌的荧光逆转录PCR方法并研究其毒力基因表达。方法将副溶血性弧菌AS079菌株添加到陈化海水中,4℃冰箱内培养,使其进入VBNC状态,针对其管家基因、鉴定基因和毒力基因分别设计实时荧光逆转录PCR引物,通过不同的PCR反应程序和引物浓度组合试验,摸索最佳反应体系条件,用于VBNC状态副溶血性弧菌的检测和毒力研究。结果用所建立的检测VBNC状态副溶血性弧...
PCR-焦磷酸测序检测单核细胞增生李斯特氏菌研究
PCR-焦磷酸测序 单核细胞增生李斯特氏菌 DNA碱基序列 hly基因
2015/11/30
建立结合PCR-焦磷酸测序检测单核细胞增生李斯特氏菌的方法。方法 根据单核细胞增生李斯特氏菌的hly基因设计扩增引物和测序引物,特异地扩增目的片段,再制备单链模板,在测序引物引导下进行焦磷酸测序,通过测序结果与GenBank中的hly基因序列的比对进行鉴定。结果 扩增引物和测序引物表现出良好的特异性,16株单核细胞增生李斯特氏菌菌株均扩增出大小249bp的DNA片段,焦磷酸测序结果与hly基因序列...
Sau-PCR分子分型技术及应用
Sau-PCR 分子分型 食源性致病菌 应用
2015/12/9
Sau-PCR是2005年新发展的一种限制性内切酶(Sau3AI)酶切和PCR扩增相结合的分子分型技术,该技术是在扩增片段长度多态性(AFLP)和随机扩增多态性DNA片段(RAPD)方法的基础上建立起来的,具有重复性好、简单、快捷等优点,近年来被逐步应用于食品污染和院内感染的分子流行病学调查。本文对Sau-PCR的原理、技术特点及其应用情况等进行了介绍。
目的建立分子信标一实时PCR技术检测婴幼儿乳粉中阪崎肠杆菌的快速方法。方法在PCR反应体 系中加入分子信标探针，探针的5’端标记FAM，3’端标记TAMRA，建立阪崎肠杆菌zpx基因分子信标一实时PCR技 术快速检测方法。结果检测方法特异性强，无非特异性扩增；分子信标一实时PCR反应体系DNA灵敏度为180 fV PCR反应体系，纯阪崎肠枰菌菌液的检出限为l02 CFU/ml，无交叉反应；以此反应...