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探讨转染胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）基因的大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）移植对大鼠脊髓损伤后神经轴突再生的影响。方法：取SD雌性大鼠的双侧股骨，冲洗髓腔分离培养得到的BMSCs，通过荧光素标记技术检测细胞表面标志物CD29、CD90、CD34、CD45，以确认是否得到BMSCs。构建GDNF过表达慢病毒用以感染BMSCs，加入感染分数分别为10、50、80、100、150、200的重组...
载BDNF基因PEG-PLGA纳米微球的制备及其转染外源性神经干细胞的研究
纳米微球 神经干细胞 基因治疗 转染
2020/6/11
构建转染后能表达神经修复功能蛋白的载脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophic factor，BDNF）基因的聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸纳米微球［poly(ethylene glycol)-poly(lactin-co-glycolic acid)-BDNF-nanoparticles,PEG-PLGA-BDNF-NPs］；探讨其转染外源性神经干细胞（neural s...
北京航空航天大学常凌乾、樊瑜波教授团队在《Trends in Biotechnology》发表综述：可穿戴生物芯片在单细胞传感和基因转染中的应用（图）
北京航空航天大学 常凌乾 樊瑜波 可穿戴生物芯片 单细胞传感 基因转染
2019/4/17
柔性可穿戴生物医学芯片目前主要可应用于皮肤或器官生理信号传感器、透皮给药、在体基因转染（图1）。近年来，微纳米技术的发展，使可穿戴传感器在单细胞精度上进行长时间、实时生理参数的检测。另一方面，基于微纳米结构的在体透皮递送系统可以实现精确分子递送，包括小分子（如葡萄糖等）和大分子（如蛋白，质粒等）。最新报道的一些纳米转染芯片可以有效地表贴于皮肤上，并在单细胞精度上进行基因转染。与常规方法相比，纳米芯...
通过慢病毒将血管内皮生长因子（VEGF）基因转染于人脂肪干细胞（HADSCs），检测其上清液（CM）中生长因子的表达，并用其上清液作用于人皮肤成纤维细胞（HDFs）及人脐静脉内皮细胞（HUVECs），观察对这2种细胞活力和迁移的影响。方法：准备HADSCs、HDFs及HUVECs 3种细胞并鉴定；将携带VEGF165基因的慢病毒转染于HADSCs，定时收集上清液；ELISA法检验上清中生长因子分泌...
目的:RNA干扰DEK基因表达对舌鳞状细胞癌(简称鳞癌)细胞增殖凋亡的影响。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测舌鳞癌组织中DEK基因的表达;体外培养人舌鳞癌细胞系Tca8113和CAL-27,将合成的阴性对照小干扰RNA(siRNA,阴性对照组)及DEK-siRNA(转染组)转染至细胞,不经特殊处理的细胞为空白对照组,分别在转染48 h后,用细胞计数试剂盒(CCK-8)法、流式细胞术...
双基因转染犬骨髓间充质干细胞复合HA/ZrO2生物材料新型组织工程骨的构建及其体外成骨能力的研究
组织工程 骨 间充质干细胞 骨髓 基因,修饰 骨形态发生蛋白质2 血管内皮生长因子
2016/12/12
目的 构建骨形态发生蛋白2(BMP-2)、血管内皮细胞生长因子165(VEGF165)双基因修饰的骨髓间充质干细胞(BMSCs)复合羟基磷灰石复合二氧化锆(HA/ZrO2)生物材料的新型组织工程骨,并观察该组织工程骨在体外的成骨能力。方法 采用有机泡沫作为模版,干铺烧制法制备新型的蜂窝状HA/ZrO2梯度生物材料,电镜观察新型生物材料的表面特性,生物力学试验机检测其力学性能。采取1岁龄健康beag...
腺病毒介导的hVEGF基因转染细胞修复大鼠放射性皮肤溃疡的效果研究
人血管内皮细胞生长因子 转染 损伤修复
2016/1/21
评价转染人血管内皮生长因子165(hVEGF 165)重组腺病毒载体的成纤维细胞体外表达状态及转染细胞修复放射性皮肤溃疡的效果。方法 构建hVEGF165基因过表达重组腺病毒载体,转染大鼠原代成纤维细胞,通过荧光定量PCR、免疫细胞化学和Western blot观察hVEGF165体外过表达状态;清洁级SD雄性大鼠24只,50 Gy γ射线局部照射,照后7 d于受照局部注射转染hVEGF165细胞...
研究耐辐射奇球菌pprI基因活体转染对小鼠急性放射损伤的防护作用。 方法 采用SPF级纯品系BALB/c雄性小鼠,应用活体电转染技术,将pEGFP-c1空载质粒及pEGFP-c1-pprI基因重组质粒转入小鼠股前肌肉。应用60Co γ射线进行全身照射,死亡率观察组吸收剂量为6 Gy,观察照后30 d内小鼠死亡率的变化;放射效应观察组吸收剂量为4 Gy,于照后1、7、14、28和35 d观察小鼠外周...
通过构建表达载体、建立稳定转染RNA结合基序5(RNA binding motif 5，RBM5)的A549细胞系，初步研究RBM5基因过表达对A549 细胞增殖以及天冬-谷-丙-组氨酸盒多肽15[DEAH box polypeptide 15，DHX15]表达的影响。方法：应用分段克隆法构建pcDNA3.1(+)/RBM5真核表达载体；将测序验证后的重组质粒pcDNA3.1(+)/RBM5转染肺...
几种脂质体对LI-7肝癌细胞株的转染效率研究
脂质体 pGenesil-1质粒 肝癌细胞 转染效率
2014/11/3
比较Lipofectamine2000、lipoplexes和apoE-lipoplexes三种脂质体对Li-7肝癌细胞的转染效率。方法 构建普通阳离子脂质体lipoplexes和载脂蛋白apoE修饰脂质体apoE-lipoplexes;使用Lipofectamine2000，lipoplexes和apoE-lipoplexes三种脂质体运载以EGFP为报告基因的pGenesil-1质粒转染Li-...
NFκB核定位基序增强超声微泡介导的外源基因转染效率
微泡 核定位信号 NFκB 基因转染
2014/11/14
评价NFκB核定位基序增强超声靶向微泡破坏（UTMD）介导的外源基因转染效率的价值。方法 构建人基质细胞衍生因子1α（phSDF-1α）质粒（phSDF-1α组），并插入NFκB核定位基序，构建具有核输入功能的目的基因质粒phSDF-1α-NFκB（phSDF-1α-NFκB）。用Cy3核酸染料标记两种质粒后在优化的UTMD条件下分别转染人脐静脉血管内皮细胞。CCK-8检测细胞存活率，流式细胞仪和...
观察重组血管紧张素（1-7）[angiotensin 1-7，Ang(1-7)]对大鼠急性心肌梗死(acute myocardial infarction，AMI)后细胞外基质重构的影响，并探讨其可能的分子机制。 方法 40只成年雄性SD大鼠按随机数字表法分为4组：假手术组(SHAM)、心肌梗死组(MI)、报告基因组(MI+EGFP)和Ang(1-7)组[MI+Ang(1-7...
探讨4-1BBL基因转染对Raji细胞功能及利妥昔单抗活性的影响。方法 采用脂质体法将4-1BBL基因转染Raji细胞，实验分为转染组（4-1BBL组）、转染空质粒组（Mock组）及未转染组（对照组）。Western blotting鉴定转染48h后各组4-1BBL蛋白水平，采用CCK-8法检测不同浓度（20.0、10.0、5.0、2.5、1.25、0.625mg／ml）利妥昔单抗处理48h后Ra...
检测真核质粒pMAGEA3-IRES-SEA经过电穿孔转染在小鼠中的转录。方法 将葡萄球菌肠毒素A(staphylococcal endotoxin A，SEA)和喉癌来源的黑色素瘤抗原A3(melanoma- associated antigen A3，MAGE-A3)，构建成基因共表达的真核质粒pMAGEA3-IRES-SEA。将pMAGEA3-IRES-SEA用电转染的方法免疫BALB/C小...