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2023年7月20日,国际权威学术期刊Plant Physiology在线发表了生科院张群教授团队最新研究成果,题为“Phosphatidic acid regulates ammonium uptake by interacting with AMMONIUM TRANSPORTER 1;1 in Arabidopsis”。
近日,我会副秘书长、南京农业大学张群教授团队在国际权威学术期刊Plant Physiology在线发表了最新研究成果,题为“Phosphatidic acid regulates ammonium uptake by interacting with AMMONIUM TRANSPORTER 1;1 in Arabidopsis”。
中国科学院生物物理研究所专利:流感病毒聚合酶亚基PA氨基端多肽的表达纯化及PA氨基端多肽的晶体结构
通过RT-PCR技术对禽流感病毒新疆株A/Duck/XJ/4(H5N1)的PB1、PB2和PA基因分别进行了扩增及克隆,测序结果表明该毒株的PB2、PB1和PA基因全长核苷酸序列分别为2341 bp、2282 bp和2187 bp。同源性分析表明A/Duck/XJ/4(H5N1)株与禽源、野生鸟类和猪源的禽流感毒株均有很高的同源性(86.3%~99.6%)。与人源毒株相比,PB2和PA与A/HK/...
细胞色素c的前体-脱血红素细胞色素c(Apocyt.c)在细胞质中核糖体合成,之后跨线粒体膜运送,在线粒体内、外膜间隙中经酶催化与血红素Heme结合形成成熟型的细胞色素c定位于线粒体内膜外侧。 Apocyt. c的跨线粒体膜运送具有如下特点:(1)N端无导肽,(2)线粒体外膜迄今未肯定含有受体或膜蛋白组成的孔道存在。因而关于Apocyt.c的跨膜运送的机理有两种假设:(1)通过线...
基因工程菌株里氏木霉( Trichoderma reesei)生物合成的组织型纤溶酶原激活剂(tissue-type plasminogen activator, t-PA)经分离纯化后,采用还原SDS-PAGE和非还原PAGE分析达到了电泳纯,采用Superdex 75 Prep Grade凝胶过滤色谱分析达到了色谱纯;采用还原SDS-PAGE分析其相对分子质量为6.6×104,SDS-聚丙烯酰...
摘要为验证克隆的小鼠β-酪蛋白基因序列调控外源基因表达的能力,将人t-PA突变体基因的信号肽-前肽编码序列用小鼠β-酪蛋白的信号肽编码序列替换,人t-PA突变体成熟肽cDNA融合到小鼠β-酪蛋白基因的第2外显子中,从而构建成旨在应用小鼠β-酪蛋白基因序列调控人t-PA突变体基因在小鼠乳腺中表达的载体.融合基因经显微注射至小鼠的受精卵中,285枚注射的受精卵移植到13只受体小鼠.经PCR和South...
摘要 应用克隆的基因组序列作为同源臂,构建了小鼠b-酪蛋白基因定位敲入打靶载体。短臂长2.7 kb,包括小鼠b-酪蛋白基因5′端侧翼区、第1外显子、第1内含子、部分第2外显子。长臂包括小鼠b-酪蛋白基因部分第2内含子、第3 ~ 7外显子、第3 ~ 6内含子、部分第7内含子,长3.4 kb。人t-PA突变体cDNA在第2外显子中,与小鼠b-酪蛋白信号肽序列融合。正筛选标记neo放置在b-酪蛋白基因第...
摘要 稳定高效表达重组人组织型纤溶酶原激活剂 (rht PA)的CHO细胞株和表达组合突变体的细胞株进行了 3L转瓶培养 .将培养上清分别进行了Lys Sepharose 4B亲和层析和Zn2 + Sepharose 4B层析两步纯化 ,rht PA纯度提高了 5 34倍 ,比活达 2 5× 10 5IU mg ,产率为 73% ;突变体纯度提高了1119倍 ,比活达 5 9× 10 5IU...
摘要 本文报道了培养的人黑色素瘤细胞分泌的组织纤溶酶原激活剂(t-PA)的纯化方法。Bowes株人黑色素瘤细胞的分泌产物,经CM-Sephadex C--50层析,赖氨酸-Sepharose 4B,苯甲眯-sepharose 4B亲和层析后,即可得到纯化470倍的蛋白纯品。样品经聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定为均一单带,测得其分子量约为72kD。纯化的t-PA与尿激酶相比较,发现前者有更高亲和纤维蛋白的能...
摘要 利用寡核苷酸介导的定点突变方法 ,将重组人尿激酶原 ( recombinant single chain uroki-nase- type plasminogen activator,rscu- PA)中 1 51位赖氨酸 ( Lys1 51 )突变为谷氨酸 ( Glu1 51 ) ,1 54位精氨酸 ( Arg1 54)突变为谷氨酸 ( Glu1 54) ,得到尿激酶原变体基因 ( msc...
摘要 嵌合蛋白 ut- PA( u- PA与 t- PA的嵌合型纤溶酶原激活剂 )基因删除编码 u- PA中 R1 78—R1 81的 1 2个核苷酸后 ,得到的嵌合分子 ut- PA( 1 )在昆虫细胞 sf- 9中表达 ,通过苯甲脒 -Sepharose 6B亲和柱层析对表达产物进行纯化 .得到的纯品走 SDS- PAGE,结果显示 ,其分子量为60 k D.血凝块溶解实验结果表明 ,嵌合分子...
摘要 为使嵌合分子 ut- PA获得抗 PAI- 1抑制作用的性质 ,将删除了编码 u- PA中 R1 78- R1 79-H1 80 - R1 81的 1 2个核苷酸的 u- PA c DNA[u- PA( 1 ) ]的 Bam H - Eco R 部分酶切片段 ,克隆到含嵌合蛋白 ut- PA基因的转移载体 p VL 1 392 - ut- PA的相应位点中 ,构建了一个含有新的嵌合蛋白基因 ...
摘要 蚯蚓纤溶酶原激活剂(e-PA)具有多种底物特异性.对构成其的小亚基的活性中心的研究有利于阐述e-PA的结构与功能的关系.利用胰蛋白酶的特异性抑制剂TLCK(N-α-p-tosyl-L-lysinechloromethylketone)对小亚基进行抑制活性的研究,结果表明TLCK对酶促反应的抑制曲线与可逆抑制曲线相似,但在抑制剂存在下的最大反应速度与抑制剂不存在时的最大反应速度不同.结合小亚基...
摘要 赤子爱胜蚓(Eiseniafetida)体内的一种纤溶酶原激活剂(e-PA)能够降解人工合成底物N-乙酰-L-酪氨酸乙酯(ATEE),该降解反应的最适pH为8.5,而且在0.2mol/LNa2HPO4中的活性要强于在0.05mol/LTris-HCl(pH8.5)中.分别测定了e-PA的大小亚基及全酶在0.2mol/LNa2HPO4与0.05mol/LTris-HCl(pH8.5)两种体系中...

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