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该成果研发了一种鸭新城疫、鸭瘟和鸭坦布苏病毒病的多重PCR检测引物，包括针对鸭新城疫病毒、鸭瘟病毒和鸭坦布苏病毒的引物。建立了多重PCR体系，可准确检测水禽NDV、DPV、DTMUV的单一或混合感染，并对该多重PCR体系进行了优化，确定了最佳的引物比例、引物浓度和Premix rTaq酶，使得NDV、DPV、DTMUV3种病毒的DNA扩增效果更好，检测精度更高，在鉴别时具有重要优势。
新城疫病毒（Newcastle disease virus，NDV）M蛋白一种非糖基化膜相关蛋白，主要位于病毒囊膜内表面，构成了病毒囊膜和核衣壳连接的支架。研究表明，M蛋白是一种细胞核-细胞质穿梭蛋白。在NDV感染早期，M蛋白可通过自身携带的核定位信号进入细胞核。根据已报道的相关RNA病毒M蛋白功能的研究结果，推测NDV M蛋白早期的细胞核定位有利于细胞质中病毒基因组的复制和转录，并且可能会抑制细...
O、A、Asia 1型口蹄疫病毒胶体金定量检测免疫层析方法的建立
口蹄疫病毒 胶体金免疫层析 定量检测 146S
2021/5/8
旨在建立口蹄疫病毒（foot-and-mouth disease virus，FMDV）抗原血清型的快速分型和定量的检测方法，利用双抗体夹心法，将口蹄疫病毒的兔抗及豚鼠抗体作为标记胶体金与NC膜检测带的原料，分别制备出检测O、A、Asia 1血清型的3种层析试纸卡。通过对标定的抗原标准品146S检测，拟合出定量标准曲线。免疫层析方法的质量验证通过特异性、敏感性、重复性及与蔗糖密度梯度法（sucro...
新疆部分地区马疱疹病毒1型感染的血清学调查
马疱疹病毒1型 酶联免疫吸附试验 血清学调查
2021/3/30
旨在了解新疆地区马疱疹病毒1型感染的流行现状和特点，本研究于2019—2020年从新疆乌鲁木齐、昌吉州、伊犁州、巴州16处规模化马场收集1 657份马血清样品，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）进行抗体检测，对不同地区、品种、性别及年龄马匹的马疱疹病毒1型抗体阳性率进行统计分析。结果显示，乌鲁木齐、伊犁州、昌吉州、巴州马疱疹病毒1型抗体阳性率分别为39.34%、22.56%、90.52%、5.00...
鼠伤寒沙门菌烈性噬菌体的分离鉴定与生物学特性
鼠伤寒沙门菌 烈性噬菌体 生物学特性 生物防治
2021/3/30
旨在分离鼠伤寒沙门菌烈性噬菌体，为控制该病原菌感染或污染提供生物制剂。以1株从市售散装牛奶中分离到的多重耐药性鼠伤寒沙门菌为宿主菌，采用人工诱导方法，连续1周每日给3只试验鸡饲喂宿主菌悬液，7 d后，采用双层琼脂平板法从试验鸡粪便中分离培养噬菌体，并对其效价、核酸类型、宿主谱、热稳定性与酸碱耐受性以及对鼠伤寒沙门菌感染小鼠的治疗效果进行分析。结果表明：分离到1株鼠伤寒沙门菌噬菌体，命名为KM104...
旨在探讨猪德尔塔冠状病毒（PDCoV）感染仔猪对小肠杯状细胞（goblet cell，GC）的影响，将6头未吃初乳的初生仔猪静养2 d后随机分为感染组（n=3）和对照组（n=3），感染组仔猪口服接种5 mL 1×105 TCID50·mL-1 PDCoV-CHN-HG-2017毒株，对照组仔猪口服5 mL DMEM培养基。感染组仔猪分别在口服接种后22、39和70 h出现明显腹泻、脱水和嗜睡等临床...
自噬调节剂对感染日本脑炎病毒小鼠脑部细胞凋亡的影响
自噬调控药物 日本脑炎病毒 小鼠 细胞凋亡
2021/3/5
旨在研究自噬调控药物对感染日本脑炎病毒（Japanese encephalitis virus，JEV）小鼠脑部细胞凋亡的影响，本试验建立自噬调控药物处理的感染日本脑炎病毒小鼠的动物模型，其中，雷帕霉素为自噬诱导剂，渥漫青霉素及氯喹为自噬抑制剂。实验动物分成8组：DMEM对照组（Control）；JEV感染组（JEV）；JEV+雷帕霉素（Rapamycin）组（JEV+Rapa）；JEV+渥漫青霉...
TP53诱导的糖酵解和凋亡调节因子（TP53-induced glycolysis and apoptosis regulator，TIGAR）是p53下游的靶基因，具有调节糖酵解水平和抗细胞凋亡功能。由于新城疫病毒（NDV）引起细胞死亡是通过诱导凋亡产生，所以提高宿主细胞的抗凋亡水平，有助于延长细胞存活时间进而提高子代病毒的滴度。本研究根据GenBank中预测仓鼠TIGAR基因和鸡TIGAR基因...
非洲猪瘟病毒pS273R蛋白水解酶单克隆抗体制备
非洲猪瘟病毒 S273R蛋白 原核表达 单克隆抗体
2021/3/30
本研究旨在制备非洲猪瘟病毒（ASFV） S273R蛋白的特异性单克隆抗体。本研究以原核表达的非洲猪瘟病毒重组S273R蛋白免疫BALB/c小鼠，取其脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合获得杂交瘤细胞。结果显示：基于纯化的S273R蛋白建立的间接ELISA方法对杂交瘤细胞进行筛选和亚克隆，获得了4株可稳定分泌抗ASFV S273R蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株，并通过免疫印迹（Western blot）和免疫荧...
从北京地区疑似细小病毒感染的犬粪拭子中成功分离鉴定出14株犬细小病毒（CPV）毒株，并对其完整的VP2和NS1基因进行了序列分析。结果表明，鉴定到的14株CPV毒株中，7株为New CPV-2a型，7株为CPV-2c型。此外，NS1的19、33、293、588、624和656位氨基酸以及VP2的13、574位氨基酸为新鉴定的氨基酸突变位点。基于VP2、NS1基因的系统进化分析表明，大部分的New ...
疱疹病毒（herpesvirus）是一类有囊膜结构的双链DNA病毒，典型结构由双链DNA基因组、衣壳（capsid）、皮层（tegument）和囊膜（envelope）组成。其家族庞大，迄今共发现了100多种，分为甲型（α）、乙型（β）、丙型（γ）疱疹病毒亚科。疱疹病毒宿主分布极其广泛，可感染两栖类、禽类、哺乳类、灵长类和人类，主要侵害皮肤、黏膜以及神经组织，严重影响着人类及其他动物的健康。感染细...
旨在分析塞内卡病毒A型（Senecavirus A，SVA） CH-HNCY-2019株的基因组特性和演化，参考SVA毒株SVV-001（GenBank No.NC011349）全基因组序列设计8对引物，通过RT-PCR扩增和测序获得SVA CH-HNCY-2019株全基因序列并进行序列分析。结果显示，SVA分离株CH-HNCY-2019基因组全长为7 294个核苷酸，与中国分离株核苷酸相似性为9...
旨在研究口蹄疫病毒（foot-and-mouth disease virus，FMDV）结构蛋白VP1上的RGD（Arg-Gly-Asp）基序与宿主细胞表面受体整联蛋白的结合特异性，作者应用基于表面等离子共振技术（SPR）的Biacore 3000系统实时研究RGD基序分别与猪源整联蛋白αvβ6胞外区结构域、αv亚基胞外区结构域和β6亚基胞外区结构域的亲和力。首先通过结合试验筛选与RGD基序有结合...
旨在建立蓝舌病病毒（BTV）血清学ELISA抗体检测方法，本研究以原核表达并纯化的BTV NS4重组蛋白为包被抗原，通过反应条件优化，建立了一种BTV重组NS4蛋白的间接ELISA抗体检测方法。SDS-PAGE结果显示，获得大小约52 ku的NS4重组融合蛋白，主要在上清中存在，Western blot显示，纯化后的重组蛋白具有良好的抗原性。通过方阵试验进行了ELISA反应条件优化，确定了重组蛋白...