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CD8α在雄性牦牛主要免疫器官的分布
雄性牦牛 免疫器官 CD8&alpha
2015/12/2
CD8α是细胞毒性T 淋巴细胞重要的表面标志,广泛参与对MHCⅠ分子递呈抗原的识别和信号传递,对细胞免疫应答和防御机制至关重要。本研究采用RT-PCR方法克隆牦牛(Bos grunniens) CD8α编码区,通过实时荧光定量PCR、Western blot及免疫组织化学SP法,检测成年雄性牦牛的主要免疫器官(胸腺、脾、肠系膜淋巴结及血结)内CD8α mRNA及蛋白的表达。RT-PCR反应扩增得到...
Post-parturitional changes in the proportion of CD4+ and CD8+ T lymphocytes in Toxocara canis-infected mice and their offspring
pregnancy offspring immune response
2015/2/5
The aim of this study was to determine the post-parturitional changes in the proportion of the splenic CD4+ and CD8+ subpopulation of T lymphocytes after the birth of Toxocara canis infected C57Bl/6 m...
东北白鹅CD8α基因的克隆及其胞外区基因的表达与抗血清的制备
东北白鹅 CD8&alpha 基因表达 T淋巴细胞
2015/5/28
根据GenBank公布的绿头鸭CD8α(AF378373)基因序列设计引物,通过RT-PCR获得东北白鹅CD8α基因。根据测序结果设计特异性引物,克隆得到东北白鹅CD8α胞外区基因,并在pET-30a(+)及pET-28a(+)/Rosetta(DE3) pLysS系统中进行原核表达。经IPTG诱导重组蛋白质获得表达,Ni-NTA柱亲和层析获得纯化的重组蛋白质,以纯化的重组蛋白质(pET-30a-...
雏鸭肝炎病毒感染后鸭CD8α基因及其通路相关基因表达变化
鸭 CD8α基因 雏鸭肝炎病毒 基因表达
2013/11/29
本研究旨在了解雏鸭肝炎病毒感染后鸭CD8α基因及其通路相关基因表达变化。通过对3日龄无母源抗体的金定鸭雏鸭感染雏鸭肝炎病毒(DHV),构建雏鸭肝炎感染实验动物模型,对雏鸭肝炎病毒发病组、未发病组和对照组的胸腺、肝脏、脾脏、肺、肾脏、大脑、小脑等组织CD8α基因及其信号通路上MHCⅠ、MHCⅡ、TNF-α等基因进行RT-qPCR检测。结果表明:在攻毒组(发病组和未发病组)扩增出DHV 3D基因的保守...
鸭CD8α基因克隆及不同禽类分子进化分析
鸭 CD8α 克隆 进化
2013/11/29
采用RT-PCR和LD-PCR技术克隆了5个鸭种(金定鸭、樱桃谷北京鸭、番鸭、绿头鸭和斑嘴鸭)CD8α基因编码区序列,结合GenBank中已有禽类(红色原鸡、北京油鸡、斑胸草雀和火鸡)的CD8α序列,采用Jmodeltest最适核苷酸替代模型筛查,使用DAMBE V4.5.2对核苷酸替换(转换/颠换)的饱和性进行检测;并采用最大似然法检测各位点承受的选择压力。测序结果表明,不同鸭种间仅发现少数点突...
鸭CD8α基因启动子区的克隆及荧光素酶报告基因重组体的构建
鸭 CD8α基因 启动子 荧光素酶报告基因
2012/8/9
旨在了解分化群α基因可能的调控序列及其转录调控机制。本研究利用基因组步移技术扩增鸭CD8α基因的启动子区序列,使用在线软件进行序列分析;分别将鸭肝炎易感组和抗性组的CD8α基因启动子区定向亚克隆至荧光素酶表达载体pGL3Basic 中,利用酶切与测序技术进行鉴定;并瞬时转染细胞,采用荧光素酶报告基因系统检测启动子载体的活性。结果,扩增出一条长度为2 480 bp的片段(包含第一外显子56 bp,...
【目的】分析比较中国部分品种鸭的CD3ε、CD4和CD8α基因ORF序列,为研究CD3ε链、CD4和CD8α链的结构和功能及其抗体的应用提供依据。【方法】利用RT-PCR,对麻鸭、樱桃谷鸭的CD3ε、CD4和CD8α基因ORF序列克隆测定,应用ClustalX(1.83)和DNAstar生物学软件分别与GenBank上公布的北京鸭CD3ε(AF378704)、CD4(AF378701)和CD8α(...
【目的】分析比较中国部分品种鸭的CD3ε、CD4和CD8α基因ORF序列,为研究CD3ε链、CD4和CD8α链的结构和功能及其抗体的应用提供依据。【方法】利用RT-PCR,对麻鸭、樱桃谷鸭的CD3ε、CD4和CD8α基因ORF序列克隆测定,应用ClustalX(1.83)和DNAstar生物学软件分别与GenBank上公布的北京鸭CD3ε(AF378704)、CD4(AF378701)和CD8α(...
猪CD8α分子基因的克隆与初步鉴定
猪 CD8α 克隆
2009/5/20
[ 目的] 为了研究CD8 分子的生物学功能。[ 方法] 自行设计一对引物, 从猪脾细胞中, 克隆了猪CD8α链基因, 获得大小为700 bp
的基因片段, 并对其进行鉴定。[ 结果] 结果表明, 该基因片段的核苷酸序列与已报道猪的同源性为99 .2% , 与豚鼠、人、猴子、猫和狗的同源性分别为35 .6 % 、55 .7 %、55 .6% 、56 .4 % 和56 .8% 。[ 结论] 该研...
荧光定量RT-PCR检测鸡CD4、CD8基因表达水平
荧光定量RT-PCR 鸡 CD4 CD8 mRNA
2008/12/1
白细胞分化抗原CD4和CD8在机体免疫应答及其信号传递过程中发挥着重要作用。本试验建立了定量检测鸡CD4和CD8 mRNA表达水平的SYBR Green I实时荧光定量RT-PCR(RRT-PCR)方法,并采用该方法对26~50日龄商品鸡外周血淋巴细胞(PBL)中CD4和CD8 mRNA表达水平进行了检测。结果显示:所建立的RRT-PCR对CD4和CD8 mRNA的扩增效率分别为93%和91%;线...
用Trizol分别提取4~6周龄白莱航鸡、狼山鸡、大骨鸡、北京油鸡、仙居鸡、茶花鸡、固始鸡和隐性白羽鸡胸腺细胞的总RNA,再用Oligo-dT纤维素富集mRNA后,用RT-PCR分别扩增出鸡CD4和CD8α基因cDNA。将PCR产物克隆进T载体后测序。序列分析显示不同品种鸡的CD4 cDNA序列完全一致;中国地方品种鸡与国外品种的白莱航鸡、RPL 7系鸡在CD8α胞外区有6~13个氨基酸的差异,仙...
荧光定量RT-PCR检测鸡CD4、CD8基因表达水平
荧光定量RT-PCR 鸡 CD4 CD8 mRNA
2008/3/28
白细胞分化抗原CD4和CD8在机体免疫应答及其信号传递过程中发挥着重要作用。本实验建立了定量检测鸡CD4和CD8 mRNA表达水平的SYBR Green I实时荧光定量RT-PCR(RRT-PCR)方法,并采用该方法对26~50日龄商品鸡外周淋巴细胞(PBL)中CD4和CD8 mRNA表达水平进行了检测。结果显示:所建立的RRT-PCR对CD4和CD8 mRNA的扩增效率分别为93%和91%;线...